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熒光染料的檢測及光學(xué)濾光片的選型

熒光染料能夠吸收特定波長(cháng)區域的能量，然后在其他特定波長(cháng)區域內重新發(fā)射該能量。一般來(lái)說(shuō)，熒光染料會(huì )被高頻率的照明（紫外UV、紫色或藍色光譜區域內的波長(cháng)）激發(fā)或吸收能量，然后會(huì )在頻率較低的照明（綠色、紅色或近紅外光譜區域內的波長(cháng)）中發(fā)射該能量。每種熒光染料都具備了能夠高效吸收能量的波長(cháng)，又稱(chēng)為峰值激發(fā)波長(cháng)λ (nm)，以及能夠將所吸收到的最多能量重新發(fā)射的對應波長(cháng)，又稱(chēng)為峰值發(fā)射波長(cháng)λ (nm)。選擇單獨光學(xué)濾光片以及最大透射的波長(cháng)將能夠確保您獲得清晰度最高的圖像。

濾光片一：激發(fā)濾光片
激發(fā)濾光片是放置于熒光檢測裝置的照明路徑內。其目的是用于過(guò)濾光源中的所有波長(cháng)，除了受檢測熒光染料的激發(fā)能量范圍。濾光片的最小透射(%)是決定圖像亮度和清晰度的關(guān)鍵。對于任何激發(fā)濾光片，富愛(ài)其光電建議使用的最小透射為40%，最理想的透射為>85%。激發(fā)濾光片的帶寬應完全出現在熒光團的激發(fā)能量范圍內，而最理想的濾光片的中心波長(cháng)(CWL)應盡可能與受檢測的熒光團的峰值激發(fā)波長(cháng)的長(cháng)度相近。由于光密度(OD)是決定濾光片如何截止帶寬中波長(cháng)的衡量標準，因此激發(fā)濾光片的光密度是圖像背景暗度的關(guān)鍵。建議使用的最小光密度為3.0，最理想的光密度為6.0。具備最理想的中心波長(cháng)、最小透射(%)以及光密度的光學(xué)濾光片能夠提供清晰度最高的圖像，而濾光片的最深截止則能夠確保檢測到最微弱的發(fā)射信號。


濾光片二：發(fā)射濾光片
發(fā)射濾光片是放置于熒光檢測裝置的成像路徑內。其目的是用于過(guò)濾受檢測熒光團的整個(gè)激發(fā)能量范圍，以及透射該熒光團的發(fā)射能量范圍。對于發(fā)射濾光片，我們所建議的最小透射、帶寬、光密度以及中心波長(cháng)均與激發(fā)濾光片相同。同樣的，具備最理想的中心波長(cháng)、最小透射(%)以及光密度的發(fā)射濾光片能夠提供清晰度最高的圖像，而濾光片的最深截止則能夠確保檢測到最微弱的發(fā)射信號。

濾光片三：二向色性濾光片或分光器

富愛(ài)其光電濾光片或分光器是以45°角放置于激發(fā)濾光片與發(fā)射濾光片之間。其目的是用于將激發(fā)信號反射至受檢測的熒光染料，然后將發(fā)射信號透射至檢測設備。最理想的二向色性濾光片或分光器應能夠在最大反射率和最大透射率之間迅速過(guò)渡，激發(fā)濾光片帶寬的最理想反射率為>95%，而發(fā)射濾光片帶寬的最理想透射率為>90%。選擇濾光片時(shí)，應該將熒光的相交波長(cháng)(λ)考慮在內，以確保獲得最低雜散光和最高信噪比的熒光圖像。

東莞市富愛(ài)其光電是專(zhuān)業(yè)的光學(xué)濾光片供應商，關(guān)于熒光染料檢測、熒光二維碼檢測、熒光標識檢測濾光片的選型及應用請與富愛(ài)其光電聯(lián)系。